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耗材專區 | EZsep™WAX固相萃取柱應用于肉制品中合成著色劑的檢測

更新時間:2024-03-28       點擊次數:2147

前言

GB 5009.35-2023食品中合成著色劑的測定標準將于2024-03-06起實施,本次標準修訂在現有檢測方法的基礎上,擴充了能夠檢測的食品基質類型和著色劑種類,覆蓋了GB 2760-2014中規定的11種合成著色劑(分別為檸檬黃、新紅、菜紅、藍、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍、唾咻黃、赤蘚紅和酸性紅),以及允許添加的所有基質大類中的25種典型基質。同時前處理方法也由聚酰胺粉變更為WAX混合型弱陰離子交換反相吸附或等效固相萃取柱。

本實驗參考標準《GB 5009.35-2023 食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》,使用EZsep™WAX固相萃取柱凈化樣品,再通過E.T.氮吹濃縮儀濃縮,高效液相色譜進行檢測,建立了肉制品中合成著色劑的分析方法。

1、實驗過程

1.1 儀器與試劑

LC-20AD液相色譜儀,島津企業管理(中國)有限公司;

MPREP-SPE08手動固相萃取裝置,貨號:PZ0008,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;

E.T.氮吹濃縮儀,貨號:C020017,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;

EZsep™WAX固相萃取柱(150mg/6mL),貨號:PZ12103,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;

冷凍離心機,GL-20G-Ⅱ,上海安亭科學儀器廠;

甲醇(色譜純),購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;

甲酸,氨水,無水乙醇,乙酸銨,等化學品均為分析純或以上,購自國藥集團化學試劑有限公司;

 

水中11種色素混標,100μg/mL,壇墨質檢科技股份有限公司。

1.2 工作液配制

取色素混合標準溶液1mL,用水稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為10μg/mL的色素混標中間液。

移取10μg/mL的色素混標中間液0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mL,分別用水稀釋至1.0mL容量瓶中,得到濃度依次為0.2、0.5、1、2、5、10μg/mL的標準系列工作液。

1.3 實驗部分

準確稱取試樣2.0g,置于50mL具塞離心管中,先加入20mL石油醚,渦旋1min,超聲提取10min,10000r/min離心5min,棄去上清液,加入25mL乙醇氨水溶液,50℃超聲提取20min,10000r/min離心10min,取上清液置于50mL容量瓶中,每次加入約5mL乙醇氨水溶液重復提取操作四次,離心后合并上清液于50mL容量瓶中,用乙醇氨水溶液定容至刻度即得提取液。準確吸取提取液10mL,50℃氮氣濃縮至3mL左右,分3次共加入10mL5%甲醇水溶液溶解,作為待凈化液,待凈化。

將EZsep™WAX固相萃取柱(150mg/6mL,貨號:PZ12103)依次用6mL甲醇、6mL水活化后,取1.3.1待凈化液上樣,上樣結束后再依次用6mL2%甲酸水溶液、6mL甲醇淋洗固相萃取柱,之后用氮氣吹干萃取柱2min,以6mL 2%氨化甲醇溶液洗脫并收集洗脫液,經E.T.氮吹濃縮儀在50℃下氮氣濃縮至近干,再加0.2mL甲醇,用0.02mol/L乙酸銨稀釋至2.0 mL,渦旋1min,PTFE微孔濾膜過濾,高效液相色譜測定。

1.4 LC分析

色譜柱:C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)

 

流動相:A:0.02mol/L乙酸銨溶液 B:甲醇;

流速:1.0mL/min

檢測波長:415nm、520nm、610nm

進樣量:10μL

表1 流動相梯度洗脫表

img1 

2、       實驗結果

表2 加標回收率結果

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img3 

圖1 1.0μg/mL混標色譜圖

 

img4 

圖2 樣品加標色譜圖

img5 

圖3 空白樣品色譜圖

3、結論

本實驗使用EZsep™WAX固相萃取柱(150 mg/6mL,貨號:PZ12103,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司)對肉制品中合成著色劑進行凈化后測定,該方法的加標回收率在62.2%~95.0%之間,RSD在0.5%~3.9%之間。準確性和精密度均滿足GB 5009.35-2023要求,且實驗方法穩定、可靠。

4、參考文獻

[1] GB 5009.35-2023 食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定

 

 

 

 

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